滅菌:分裝好的培養基應立即進行滅菌。滅菌的方法種類如下:1.高壓蒸汽滅菌法:大多數熱培養基都可用此法,小量分裝時,用121℃、15min;滅菌量大時,用121℃、30min滅菌;含糖類的培養基只能113℃~115℃、15min滅菌,避免糖類遭破壞。2.煮沸滅菌:對含有不耐高溫物質的培養基,可使用此方法。3.過濾除菌:以過濾的方法除菌,用無菌操作技術,定量加入培養基。血液、物品可用無菌操作技術抽取,加入冷卻到50℃左右的培養基中。培養基含有不耐熱的物質時,可用此法。全自動培養基制備儀主要特點:無需排干空氣。湖北Systec培養基制備器
固體斜面培養基配制:培養基各成份的混合和溶化:培養基所用化學藥品均應是化學純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋,以防有微量銅或鐵混入培養基中,使細菌不易生長。較好使用不銹鋼萵加熱溶化,可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時、可先用溫水加熱并隨時擾動、以防焦化、如發現有焦化現象、該培養基即不能使用,應重新制備。待大部分固體成分溶化后,再用較小火力使所有成分完全溶化,迄至煮沸。如為瓊脂溶化,用另一部分水溶化其它成分,然后將兩溶液充分混合。在加熱溶化過程中,因蒸發而丟失的水分,較后必須加以補足。培養基pH的初步調正:因培養基在加熱消毒過程中、pH會有所變化,培養基各成分完全溶解后,應進行PH的初步調正。北京大容量 培養基制備器培養基制備器全自動控制程序,確保內部溫度均一。
制備培養基的操作要點:用過的玻璃器皿:凡確無病原菌或未被帶菌物污染的器皿,使用后可隨時沖洗,吸取過化學試劑的吸管,可先浸泡于清水中,待到一定數量后再集中進行清洗。有可能被病原菌污染的器皿,必須經過適當消毒后,將污垢除去,用皂液洗刷,再用流水沖洗干凈。若用皂液未能洗凈的器皿,可用洗液浸泡適當時間后再用清水洗凈。洗液的主要成份是重鉻酸鉀和濃流酸,其作用是將有機物氧化成可溶性物質,以便沖洗。洗液有很強的腐蝕作用,使用時應特別小心,避免濺到衣服、身體和其他物品上。
濕熱滅菌:濕熱滅菌在高壓鍋或培養基制備器中進行,高壓滅菌一般采用121℃±3℃滅菌15min,具體培養基按食品微生物學檢驗標準中的規定進行滅菌。培養基體積不應超過1000mL,否則滅菌時可能會造成過度加熱。所有的操作應按照標準或使用說明的規定進行。滅菌效果的控制是關鍵問題。加熱后采用適當的方式冷卻,以防加熱過度。這對于大容量和敏感培養基十分重要,例如含有煌綠的培養基。過濾除菌:過濾除菌可在真空或加壓的條件下進行。使用孔徑為0.2μm的無菌設備和濾膜。消毒過濾設備的各個部分或使用預先消毒的設備。一些濾膜上附著有蛋白質或其他物質(如物品),為了達到有效過濾,應事先將濾膜用無菌水潤濕。培養基制備器解凍血清時,請按照的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫)。
一種斜面培養基制備器,包括底板,所述底板左右兩側分別固定一塊側板,底板前側設置一塊擋板,兩塊所述側板上對應著開設一條豎直縫并分別在豎直縫前后側開設若干條水平縫,還包括一根靠桿,靠桿兩端分別穿過兩側板上對應水平縫并以可拆卸連接方式固定。作為選擇,所述擋板內側從左到右等間隔設置若干隔板,所述靠桿上從左到右等間隔設置與隔板數量對應的固定凸塊。靠桿與側板之間的連接方式有兩種選擇方式。第一種為:所述靠桿一端卡在水平縫外,另一端設置螺紋段并用螺母實現與側板之間的固定。培養基是生物制品領域中常用的物質,在細菌和細胞培養中十分必要。湖北Systec培養基制備器
培養基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯亂,較好一次完成,不要中斷。湖北Systec培養基制備器
MS培養基的特點:MS培養基普遍被使用,它的無機鹽濃度較高,十分有利于組織生長所需的礦質營養和加速愈傷組織的生長。因為配方中的離子濃度高,在配制、貯存、消毒等過程中,即使有些成分略有出入,也不會對離子間的平衡造成比較大的影響。MS固體培養基可以用來對愈傷組織可以進行誘導,或者用來培養胚、莖段、莖尖及花藥。在進行細胞懸浮培養時,它的液體培養基能夠得到非常明顯的效果。在這種培養基中,有比較適當比例和數量的無機養分,能夠滿足植物細胞在營養上和生理上的需要。所以,通常情形下,氨基酸、酪蛋白水解物、酵母提取物及椰子汁等有機附加成分不需要再被添加。MS培養基中的硝酸鹽、鉀和銨的含量相比于其它培養基的基本成分要更加的高,這亦是其的明顯特征。湖北Systec培養基制備器